離子色譜法(IC)是利用離子交換原理,連續對共存的多種陰離子或陽離子進行分離、定性和定量的方法。離子色譜儀由、進樣閥、分離柱、抑制柱和電導檢測裝置等組成。測定時,流動相(淋洗液)將樣品帶入分離柱,由于各種離子對分離柱中離子交換樹脂的親和性不同,樣品在分離柱上分離成不連續的譜帶,并依次被洗脫,然后用電導檢測器進行檢測,分析陽離子時,分離柱采用低容量的陽離子交換樹脂,用鹽酸溶液作淋洗液。分析陰離子時,分離柱采用低容量的陰離子交換樹脂,淋洗液用氫氧化鈉溶液或碳酸鈉與的混合溶液。
離子色譜流動相輸運系統
離子色譜儀器的輸液系統包括貯液罐、高壓、梯度淋洗裝置等,與高效液相色譜的輸液系統基本相似。
1、貯液罐
溶劑貯存主要用來供給足夠數量并符合要求的流動相,對于溶劑貯存器的要求是:
(1)必須有足夠的容積,以保證重復分析時有足夠的供液;
(2)脫氣方便;
(3)能承受一定的壓力;
(4)所選用的材質對所使用的溶劑一律惰性。
2、高壓
高壓是離子色譜儀的重要部件,它將流動相輸入到分離系統,使樣品在柱系統中完成分離過程。離子色譜用的高壓泵應具備下述性能:
(1)流量穩定:通常要求流量精度應為±1%左右,以保證保留時間的重復和定性定量分析的精度。
(2)有一定輸出壓力,離子色譜一般在20MPa狀態下工作,比高效液相色譜略低。
(3)耐酸、堿和緩沖液腐蝕,與高效液相色譜不同,離子色譜所有淋洗液含有酸或堿,泵應采用全塑Peek材料制作。
(4)壓力波動小,更換溶劑方便,死體積小,易于清洗和更換溶劑。
(5)流量在一定范圍任選,并能達到一定精度要求。
(6)部分具有梯度淋洗功能。
3、梯度淋洗裝置
梯度淋洗和氣相色譜中的程序升溫相似,給色譜分離帶來很大的方便,但離子色譜電導檢測器是一種總體性質的檢測器,因此梯度淋洗一般只在含氫氧根離子的淋洗液中采用抑制電導檢測時才能實現。
采用梯度淋洗技術可以提高分離度、縮短分析時間、降低檢測限,它對于復雜混合物,特別是保留強度差異很大的混合物的分離,是極為重要的手段。
離子色譜的進樣系統
離子色譜的進樣主要分為3種類型:即氣動、手動和自動進樣方式。
1、手動進樣閥
手動進樣采用六通閥,其工作原理與HPLC相同,但其進樣量比HPLC要大,一般為50μL。它的結構如圖2.4所示,其定量管接在閥外,一般用于進樣體積較大時的情況。樣品首先以低壓狀態充滿定量管,當閥沿順時針方向旋至另一位置時,即將貯存于定量管中固定體積的樣品送入分離系統。
2、氣動進樣閥
氣動閥采用一定氦氣或氮氣氣壓作動力,通過兩路四通加載定量管后,進行取樣和進樣,它有效地減少了手動進樣因動作不同所帶來的誤差。
3、自動進樣
自動進樣器是在色譜工作站控制下,自動進行取樣、進樣、清洗等一系列操作,操作者只須將樣品按順序裝入貯樣機中。